Deloris (Whoopi Goldberg) ist eine lebensfrohe Frau und arbeitet als Sängerin in einer Bar. Eines Tages wird sie jedoch Zeuge, wie ihr Freund Vincent (Harvey Keitel), ein lokaler Mafia-Boss, einen seiner Feinde kaltblütig ermordet. Da Vincent es nicht mag, wenn Zeugen anwesend sind, versucht er auch, Deloris zu ermorden. Doch Deloris kann in letzter Sekunde entkommen und findet Schutz bei der Polizei. Aus Sicherheitsgründen wird sie in ein Zeugenschutzprogramm aufgenommen und an einen Ort gebracht, an dem man sie am wenigsten vermuten würde: ein Konvent in San Francisco. Anfangs fällt es ihr schwer, ihren Platz unter den Nonnen zu finden, doch das ändert sich schnell, als sie die Leitung des Klosterchors übernimmt und damit zu einer regionalen Berühmtheit wird. Durch die neu gewonnene Aufmerksamkeit findet jedoch auch Vincent heraus, wo sich seine dringend gesuchte Zeugin aufhält.

Der Film entstand unter der Regie von Emile Ardolino, Produzent war Scott Rudin. Ein prägendes Element der Produktion war die Musik: Marc Shaiman komponierte die Filmmusik, während der Soundtrack stark von Gospel- und Soul-Traditionen inspiriert ist. Besonders die neu arrangierten Kirchenchor-Versionen bekannter Songs trugen wesentlich zur Popularität des Films bei. „Sister Act” entwickelte sich zu einem großen kommerziellen Erfolg und spielte weltweit ein Vielfaches seines Budgets ein. Der Erfolg inspirierte später ein erfolgreiches Musical, das unter anderem im Londoner West End und am Broadway aufgeführt wurde. Darüber hinaus gilt der Film als wichtiger Meilenstein in der Karriere von Whoopi Goldberg, da er ihr Image als komödiantische Hauptdarstellerin nachhaltig festigte.